海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義：

海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖，是由兩個(gè)葡萄糖分子組成的一個(gè)非還原性雙糖，能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細(xì)胞表面形成的保護(hù)膜，有效地保護(hù)生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞，從而維持生命體的生命過(guò)程和生物特征。

植物體內(nèi)主要以葡萄糖為底物合成海藻糖，海藻糖-6-磷酸酯酶 (trehalose 6-phosphate phosphatase，TPP)是該途徑中海藻糖合成關(guān)鍵酶之一，該反應(yīng)首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase，TPS)的作用下?杈?

測(cè)定原理：

TPP催化海藻糖-6-磷酸產(chǎn)生海藻糖，同時(shí)釋放出磷酸根，使用鉬銻抗比色法測(cè)定。

需自備的儀器和用品：  

酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

Spacemaker蛋白ELISA試劑盒 SPAM免費(fèi)代測(cè)試劑

Sp100核抗原ELISA試劑盒 Sp100免費(fèi)代測(cè)試劑

Snurportin1蛋白ELISA試劑盒 SNUPN1免費(fèi)代測(cè)試劑

Snail同源物1ELISA試劑盒 SNAI1免費(fèi)代測(cè)試劑

Smoothened蛋白ELISA試劑盒 SMO免費(fèi)代測(cè)試劑

Smad同源物4ELISA試劑盒 Smad4免費(fèi)代測(cè)試劑

Slingshot同源物3ELISA試劑盒 SSH3免費(fèi)代測(cè)試劑

Slingshot同源物2ELISA試劑盒 SSH2免費(fèi)代測(cè)試劑

Slingshot同源物1ELISA試劑盒 SSH1免費(fèi)代測(cè)試劑

Sideroflexin5蛋白ELISA試劑盒 SFXN5免費(fèi)代測(cè)試劑

Sideroflexin4蛋白ELISA試劑盒 SFXN4免費(fèi)代測(cè)試劑

Sideroflexin3蛋白ELISA試劑盒 SFXN3免費(fèi)代測(cè)試劑

Sideroflexin2蛋白ELISA試劑盒 SFXN2免費(fèi)代測(cè)試劑

Shootin1蛋白ELISA試劑盒 Shootin1免費(fèi)代測(cè)試劑

Shisa同源物5ELISA試劑盒 SHISA5免費(fèi)代測(cè)試劑
海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測(cè)試盒20T/10樣NADPH氧化酶活性測(cè)試盒/比色法

50管/48樣NADP磷酶(NADPase)測(cè)試盒/分光光度法

100管/96樣NADP磷酶(NADPase)測(cè)試盒/微量法

50管/48樣NADP蘋果酶(NADP-ME)測(cè)試盒/分光光度法

100管/96樣NADP蘋果酶(NADP-ME)測(cè)試盒/微量法

50管/48樣NADP-蘋果脫氫酶(NADP－MDH)測(cè)試盒/分光光度法

100管/96樣NADP-蘋果脫氫酶(NADP－MDH)測(cè)試盒/微量法

50T/24樣NAD激酶(NADK)測(cè)試盒/比色法

50管/24樣NAD激酶(NADK)測(cè)試盒/分光光度法
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。